"逆轉錄"是指,在生物學中以RNA為模板合成DNA的過程,即RNA指導下的DNA合成。此過程中,核酸合成與轉錄(DNA到RNA)過程與遺傳信息的流動方向(RNA到DNA)相反,故稱為逆轉錄。逆轉錄過程是RNA病毒的復制形式之一,在逆轉錄的過程中需要逆轉錄酶的催化。故而逆轉錄酶在RNA逆轉錄的過程中起著不可或缺的作用。

簡要過程如下:
逆轉錄酶的作用是以dNTP為底物,以RNA為模板,tRNA(主要是色氨酸t(yī)RNA)為引物,在tRNA3'-末端上,按5'→3'方向,合成一條與RNA模板互補的cDNA單鏈,它與RNA模板形成RNA-cDNA雜交體。隨后又在反轉錄酶的作用下,水解掉RNA鏈,再以cDNA為模板合成第二條DNA鏈,完成由RNA指導的DNA合成過程。
應用背景:
逆轉錄在分子生物領域已有很廣泛的應用,比如逆轉錄,主要是提取組織或細胞中的總RNA,以RNA為模板,利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA,再以cDNA鏈為模板進行PCR擴增,從而獲得大量拷貝。逆轉錄PCR的出現(xiàn)使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數(shù)量級,使一些極為微量RNA樣品分析成為可能。這在體外診斷領域給予了很大的幫助。
臨床應用:
逆轉錄PCR可用于分析基因的轉錄產(chǎn)物、檢測細胞中RNA病毒的含量、合成cDNA探針、直接克隆特定基因的cDNA序列等。如在臨床上RT-PCR可以用于遺傳病診斷、癌癥檢測、檢測病人標本中的RNA病毒,如HAV、HCR、HIV等。
西寶生物致力于開發(fā)品質優(yōu)良的體外診斷原材料,潛心研發(fā),注重品質,我們開發(fā)出了一種新型逆轉錄酶,Seebio(R) Reverse Transcriptase是Seebio(R)逆轉錄酶家族中一個全新的成員,詳情可咨詢400-021-8148!
截止目前市場上逆轉錄酶數(shù)不勝數(shù),很多逆轉錄酶能夠在基本性能上滿足科學家在研發(fā)過程中的使用比如(擴增長度、靈敏度、可重復性、產(chǎn)量),但當存在抑制劑、RNA被降解、樣本制備困難的時候、實際使用就會低于預期,這時Seebio®Reverse Transcriptase逆轉錄酶就有非同一般的表現(xiàn)。西寶生物系列逆轉錄產(chǎn)品,與市面上其他逆轉錄產(chǎn)品相比,擁有更高的逆轉錄反應溫度,cDNA產(chǎn)量更高,具有更完整的基因代表性。
產(chǎn)品概述
Seebio(R) 逆轉錄酶是一種大腸桿菌重組表達的鼠白血病逆轉錄酶,是一款全新的逆轉錄酶,可進行逆轉錄反應。對于復雜二級結構的RNA,可將逆轉錄溫度提高到50~55℃,避免RNA復雜二級結構對cDNA合成的抑制,可合成質量優(yōu)良的cDNA。除此之外,本產(chǎn)品具有持續(xù)合成能力和雜質耐受度高。可提供更高的全長cDNA產(chǎn)量,具有更完整的基因表現(xiàn)性。產(chǎn)品咨詢:400-021-8158!
產(chǎn)品優(yōu)勢
1)逆轉錄效率高、產(chǎn)量優(yōu)良:缺失了RNA酶H活性,具有更強的延伸能力和穩(wěn)定性,具有優(yōu)良的逆轉錄效率,可提供較普通逆轉錄酶更高的全長cDNA產(chǎn)量;
2)耐熱性及穩(wěn)定性強:逆轉錄酶耐受高溫的能力是cDNA合成的重要影響因素,Seebio逆轉錄酶在50-55℃下具有更高的熱穩(wěn)定性和更長的半衰期;
3)適用性廣兼容性好:可兼容動物、植物、病毒等多種模板;
4)雜質耐受強:對于常見雜質(乙醇、異丙醇、水平衡酚、異硫氰酸胍、腐殖酸)均具有強耐受度。
2)耐熱性及穩(wěn)定性強:逆轉錄酶耐受高溫的能力是cDNA合成的重要影響因素,Seebio逆轉錄酶在50-55℃下具有更高的熱穩(wěn)定性和更長的半衰期;
3)適用性廣兼容性好:可兼容動物、植物、病毒等多種模板;
4)雜質耐受強:對于常見雜質(乙醇、異丙醇、水平衡酚、異硫氰酸胍、腐殖酸)均具有強耐受度。
產(chǎn)品組分
產(chǎn)品 | 組分 | 產(chǎn)品編號 | 訂購規(guī)格 |
Seebio? Reverse Transcriptase | Seebio? Reverse Transcriptase(200U/μl) Seebio? dNTP Mixture 5× RT Buffer RNase-free ddH2O | DAA0309B | 2KU 10KU 4*10KU |
保存條件
-30~-15℃儲存。于-20~0℃運輸。
單位定義
以Poly (rA) Oligo (dT)為模板/引物,在37℃,10 min條件下,摻入1 nmol的dTTP為酸不溶性物質所需要的酶量定義為1個活性單位 (U)。
產(chǎn)品應用
總RNA或者mRNA合成cDNA第一鏈,合成的cDNA第一條鏈后續(xù)可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二條鏈的合成等。
注意事項
防止RNase污染:請保持實驗區(qū)域潔凈;實驗室時需穿戴干凈的手套、口罩;實驗所用的離心管、槍頭等耗材均需保證RNase-free。
功能數(shù)據(jù)
逆轉錄體系中加入200U本酶,以1pg 293細胞總RNA為模板,Oligo(dT)20為引物,42℃反應15min。取1/10 cDNA產(chǎn)物進行PCR擴增GAPDH基因。瓊脂糖凝膠電泳,可見有單一的550bp條帶。
耐熱數(shù)據(jù)
溫度對普通逆轉錄具有較大影響,反應溫度由42℃升到52℃,MMLV-RTs效果顯著變差,C(t) 值由18升到25,但對于Seebio-RTs的影響不顯著, C(t)值未發(fā)生顯著改變。
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西寶生物可提供各種分子診斷酶產(chǎn)品,均可定制大包裝,詳情咨詢西寶生物400-021-8158!或者聯(lián)系我司診斷團隊。
"逆轉錄"是指,在生物學中以RNA為模板合成DNA的過程,即RNA指導下的DNA合成。此過程中,核酸合成與轉錄(DNA到RNA)過程與遺傳信息的流動方向(RNA到DNA)相反,故稱為逆轉錄。逆轉錄過程是RNA病毒的復制形式之一,在逆轉錄的過程中需要逆轉錄酶的催化。故而逆轉錄酶在RNA逆轉錄的過程中起著不可或缺的作用。

簡要過程如下:
逆轉錄酶的作用是以dNTP為底物,以RNA為模板,tRNA(主要是色氨酸t(yī)RNA)為引物,在tRNA3'-末端上,按5'→3'方向,合成一條與RNA模板互補的cDNA單鏈,它與RNA模板形成RNA-cDNA雜交體。隨后又在反轉錄酶的作用下,水解掉RNA鏈,再以cDNA為模板合成第二條DNA鏈。至此,完成由RNA指導的DNA合成過程。
應用背景:
逆轉錄在分子生物領域已有很廣泛的應用,比如逆轉錄,主要是提取組織或細胞中的總RNA,以RNA為模板,利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA,再以cDNA鏈為模板進行PCR擴增,從而獲得大量拷貝。逆轉錄PCR的出現(xiàn)使RNA檢測的靈敏性上升了幾個數(shù)量級,使一些極為微量RNA樣品分析成為可能。這在體外診斷領域大大提高了效率。
臨床應用:
逆轉錄PCR可用于分析基因的轉錄產(chǎn)物、檢測細胞中RNA病毒的含量、合成cDNA探針、直接克隆特定基因的cDNA序列等。如在臨床上RT-PCR可以應用于遺傳病診斷、癌癥檢測、檢測病人標本中的RNA病毒,如HAV、HCR、HIV等。
西寶生物致力于開發(fā)高品質的體外診斷原材料,潛心研發(fā),注重品質,我們開發(fā)出了一種新型逆轉錄酶,Seebio(R) Reverse Transcriptase是Seebio®逆轉錄酶家族中一個全新的成員,詳情可咨詢400-021-8148!
截止目前市場上逆轉錄酶數(shù)不勝數(shù),很多逆轉錄酶能夠在基本性能上滿足科學家在研發(fā)過程中的使用比如(擴增長度、靈敏度、可重復性、產(chǎn)量),但當存在抑制劑、RNA被降解、樣本制備困難的時候、實際使用就會低于預期,這時Seebio(R) Reverse Transcriptase逆轉錄酶就有非同一般的表現(xiàn)。西寶生物系列逆轉錄產(chǎn)品,與市面上其他逆轉錄產(chǎn)品相比,擁有更高的逆轉錄反應溫度,cDNA產(chǎn)量更高,具有更完整的基因代表性。
產(chǎn)品概述
Seebio(R) 逆轉錄酶是一種大腸桿菌重組表達的鼠白血病逆轉錄酶,是一款全新的逆轉錄酶,。對于復雜二級結構的RNA,可將逆轉錄溫度提高到50~55℃,避免RNA復雜二級結構對cDNA合成的抑制,可有效合成高質量的cDNA。除此之外,本產(chǎn)品具有優(yōu)越的持續(xù)合成能力和強的雜質耐受度。可提供更高的全長cDNA產(chǎn)量,具有更完整的基因表現(xiàn)性。產(chǎn)品咨詢:400-021-8158!
產(chǎn)品優(yōu)勢
1)逆轉錄效率高、產(chǎn)量優(yōu)異:缺失了RNA酶H活性,具有更強的延伸能力和穩(wěn)定性,具有較高的逆轉錄效率,可提供較普通逆轉錄酶更高的全長cDNA產(chǎn)量;
2)耐熱性及穩(wěn)定性強:逆轉錄酶耐受高溫的能力是cDNA合成的重要影響因素,Seebio逆轉錄酶在50-55℃下具有更高的熱穩(wěn)定性和更長的半衰期;
3)適用性廣兼容性好:可兼容動物、植物、病毒等多種模板;
4)雜質耐受度強:對于常見雜質(乙醇、異丙醇、水平衡酚、異硫氰酸胍、腐殖酸)均具有強的耐受度。
2)耐熱性及穩(wěn)定性強:逆轉錄酶耐受高溫的能力是cDNA合成的重要影響因素,Seebio逆轉錄酶在50-55℃下具有更高的熱穩(wěn)定性和更長的半衰期;
3)適用性廣兼容性好:可兼容動物、植物、病毒等多種模板;
4)雜質耐受度強:對于常見雜質(乙醇、異丙醇、水平衡酚、異硫氰酸胍、腐殖酸)均具有強的耐受度。
產(chǎn)品組分
產(chǎn)品 | 組分 | 產(chǎn)品編號 | 訂購規(guī)格 |
Seebio? Reverse Transcriptase | Seebio? Reverse Transcriptase(200U/μl) Seebio? dNTP Mixture 5× RT Buffer RNase-free ddH2O | DAA0309B | 2KU 10KU 4*10KU |
保存條件
-30~-15℃儲存。于-20~0℃運輸。
單位定義
以Poly (rA) Oligo (dT)為模板/引物,在37℃,10 min條件下,摻入1 nmol的dTTP為酸不溶性物質所需要的酶量定義為1個活性單位 (U)。
產(chǎn)品應用
總RNA或者mRNA合成cDNA第一鏈,合成的cDNA第一條鏈后續(xù)可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二條鏈的合成等。
注意事項
防止RNase污染:請保持實驗區(qū)域潔凈;實驗時需穿戴干凈的手套、口罩;實驗所用的離心管、槍頭等耗材均需保證RNase-free。
功能檢測
逆轉錄體系中加入200U本酶,以1pg 293細胞總RNA為模板,Oligo(dT)20為引物,42℃反應15min。取1/10 cDNA產(chǎn)物進行PCR擴增GAPDH基因。瓊脂糖凝膠電泳,可見有單一的550bp條帶。
耐熱檢測
溫度對普通逆轉錄具有較大影響,反應溫度由42℃升到52℃,MMLV-RTs效果顯著變差,C(t) 值由18升到25,但對于Seebio-RTs的影響不顯著, C(t)值未發(fā)生顯著改變。
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西寶生物可提供各種分子診斷酶產(chǎn)品,均可定制大包裝,詳情咨詢西寶生物400-021-8158!或者聯(lián)系我司診斷團隊。