細胞結團的原因
懸浮細胞可能由于各種原因相互附著并發生結團。細胞結團常見的原因是在細胞裂解之后，培養基中存在游離DNA和細胞碎片，DNA的粘性使細胞和其他碎片聚集成大的團塊。
工藝培養過程中分析細胞結團的原因來自兩方面：
1 動物細胞本身可能存在固有的細胞結團現象，如CHOS細胞；
2 動物細胞在遇到不良的營養條件和環境，也容易發生細胞聚集現象，以及培養基中Ca2+等離子的濃度也會影響細胞黏附。
聚團后的影響
細胞微環境會發生惡化如：
- 氧氣供應不足
- 代謝廢物積累
- 營養物不足等
- 細胞死亡
如何抗細胞結團？
抗細胞結團常采用的物質是多硫酸化合物，例如：肝素鈉、硫酸乙酰肝素、蘇拉明和硫酸葡聚糖。在多種多硫酸鹽化合物中，硫酸葡聚糖是在CHO細胞懸浮培養中應用廣泛的抗結團劑。
硫酸葡聚糖抗細胞結團原理
葡聚糖硫酸鈉（Dextran sulfate sodium salt，DSS）是葡聚糖的聚陰離子衍生物，由葡聚糖和氯磺酸的酯化反應形成，以鈉鹽形式提供，并通過添加少量磷酸鹽進行穩定。
不同分子量和濃度的硫酸葡聚糖的影響
2016年，科學家研究了硫酸葡聚糖的三種不同分子量（4000Da、15000Da和40000Da，其對應的S比例分別為3-6%、17-19%和15-19%），以及不同濃度（0.1-1.0g/L）對兩種不同重組CHO細胞（CHO-K1細胞和DG44細胞）的生長和單克隆抗體產量影響。并同時評估添加硫酸葡聚糖對單抗的關鍵質量屬性（如聚體、電荷變化和N-糖基化等)的影響。
前期研究發現，采用200000Da的硫酸葡聚糖，無論使用哪種濃度（0.1-1.0g/L），都會使活細胞密度和抗體濃度降低20-30％。說明采用200000Da的硫酸葡聚糖對細胞來說是有害。添加上述不同分子量不同濃度的硫酸葡聚糖對于CHOK1細胞，可以顯著維持培養后期細胞密度和活力，需要注意的是抗體表達并未對應提高。
而對于DG44細胞添加硫酸葡聚糖，尤其是40,000Da分子量對于DG44細胞，細胞聚集會大大降低。并且顯著提高了抗體產物濃度。
另外通過硫酸葡聚糖對抗體質量屬性的影響研究表明對于DG44細胞添加4000Da和15000 Da硫酸葡聚糖對單克隆抗體的電荷異構體無影響(P<0.05)，只有添加40,000Da硫酸葡聚糖才顯著降低堿性電荷異構體(P<0.05)；
添加硫酸葡聚糖對單克隆抗體的質量屬性(聚體、電荷異構體和N -糖基化)沒有負面影響，甚至可以對部分質量屬性產生積極影響，如影響單克隆抗體的電荷異構體，降低堿峰。
總之，對于細胞生長、抗體產量和質量的影響取決于硫酸葡聚糖的分子量、濃度和CHO細胞系的選擇。因此，針對不同CHO細胞系，建議優化硫酸葡聚糖的分子量和濃度，以發揮硫酸葡聚糖在單克隆抗體生產中的有益作用。
目前也有很多用硫酸葡聚糖鈉鹽,Mw 5,000 ，平均分子量約5 kD，可通過改變細胞表面的電荷，來促使單個細胞懸浮，防止細胞結團，支持細胞高密度培養，提高細胞活力。
Seebio?提供兩款高品質細胞抗結團用硫酸葡聚糖鈉Mw5000，Mw40000
產品特點
1、 質量優良：純度高，含硫量15~20%；
2、 穩定性高：聚陰離子復合物，可溶于水，形成無色溶液，形似天然粘多糖；
3、 內毒素低：低于5EU/g，對細胞傷害較小。
3、 性能突出: 能有效降低CHO、T細胞培養結團。
產品指標
總硫含量 | 15~20% |
硫酸根含量 | ≤0.2% |
熱失重（105℃，2h） | ≤10.0% |
pH | 5.0~7.5 |
旋光度 | +75°~ +105° |
鐵離子 | ≤2.0% |
氯離子含量 | ≤1000ppm |
外觀 | 白色~淡黃色粉末 |
微生物限度 | 需氧菌＜105 cfu/g |
霉菌、酵母菌總數 | ＜100 cfu/g |
內毒素 | ＜5EU/g |
訂購信息
貨號 | 產品名稱 |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 5,000（DSS） | |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 5,000（DSS），低內毒素 | |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 40,000（DSS），低內毒素 |
Seebio葡聚糖硫酸鈉系列產品
各類不同用途葡聚糖硫酸鈉（DSS）
葡聚糖硫酸鈉 | 腸炎模型 | 分子生物學 | 抗病毒 | 抗凝血劑 | 抗血脂劑 | 化妝品研發 |
6000-8000 | √ | √ | √ | |||
8000（平均） | √ | √ | √ | |||
36000-50000 | √ | √ | √ | |||
400000-600000 | √ | √ | √ | |||
1400000（平均） | √ | √ |
產品信息
貨號 | 產品名稱 |
硫酸葡聚糖鈉 2000（DSS） | |
硫酸葡聚糖鈉 3000（DSS） | |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 5,000（DSS） | |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 5,000（DSS），低內毒素 | |
硫酸葡聚糖鈉 15000（DSS） | |
硫酸葡聚糖鈉 40,000（DSS） | |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 40,000（DSS），低內毒素 | |
硫酸葡聚糖鈉 36,000~50,000（DSS） | |
硫酸葡聚糖鈉 500,000（DSS） |
西寶生物可以提供各種規格的硫酸葡聚糖鈉，平均分子量從2,000~500,000，歡迎致電400-021-8158.
細胞結團的原因
懸浮細胞可能由于各種原因相互附著并發生結團。細胞結團常見的原因是在細胞裂解之后，培養基中存在游離DNA和細胞碎片，DNA的粘性使細胞和其他碎片聚集成大的團塊。
工藝培養過程中分析細胞結團的原因來自兩方面：
1 動物細胞本身可能存在固有的細胞結團現象，如CHOS細胞；
2 動物細胞在遇到不良的營養條件和環境，也容易發生細胞聚集現象，以及培養基中Ca2+等離子的濃度也會影響細胞黏附。
聚團后的影響
細胞微環境會發生惡化如：
- 氧氣供應不足
- 代謝廢物積累
- 營養物不足等
- 細胞死亡
如何抗細胞結團？
抗細胞結團常采用的物質是多硫酸化合物，例如：肝素鈉、硫酸乙酰肝素、蘇拉明和硫酸葡聚糖。在多種多硫酸鹽化合物中，硫酸葡聚糖是在CHO細胞懸浮培養中應用廣泛的抗結團劑。
硫酸葡聚糖抗細胞結團原理
葡聚糖硫酸鈉（Dextran sulfate sodium salt，DSS）是葡聚糖的聚陰離子衍生物，由葡聚糖和氯磺酸的酯化反應形成，以鈉鹽形式提供，并通過添加少量磷酸鹽進行穩定。
不同分子量和濃度的硫酸葡聚糖的影響
2016年，科學家研究了硫酸葡聚糖的三種不同分子量（4000Da、15000Da和40000Da，其對應的S比例分別為3-6%、17-19%和15-19%），以及不同濃度（0.1-1.0g/L）對兩種不同重組CHO細胞（CHO-K1細胞和DG44細胞）的生長和單克隆抗體產量影響。并同時評估添加硫酸葡聚糖對單抗的關鍵質量屬性（如聚體、電荷變化和N-糖基化等)的影響。
前期研究發現，采用200000Da的硫酸葡聚糖，無論使用哪種濃度（0.1-1.0g/L），都會使活細胞密度和抗體濃度降低20-30％。說明采用200000Da的硫酸葡聚糖對細胞來說是有害。添加上述不同分子量不同濃度的硫酸葡聚糖對于CHOK1細胞，可以顯著維持培養后期細胞密度和活力，需要注意的是抗體表達并未對應提高。
而對于DG44細胞添加硫酸葡聚糖，尤其是40,000Da分子量對于DG44細胞，細胞聚集會大大降低。并且顯著提高了抗體產物濃度。
另外通過硫酸葡聚糖對抗體質量屬性的影響研究表明對于DG44細胞添加4000Da和15000 Da硫酸葡聚糖對單克隆抗體的電荷異構體無影響(P<0.05)，只有添加40,000Da硫酸葡聚糖才顯著降低堿性電荷異構體(P<0.05)；
添加硫酸葡聚糖對單克隆抗體的質量屬性(聚體、電荷異構體和N -糖基化)沒有負面影響，甚至可以對部分質量屬性產生積極影響，如影響單克隆抗體的電荷異構體，降低堿峰。
總之，對于細胞生長、抗體產量和質量的影響取決于硫酸葡聚糖的分子量、濃度和CHO細胞系的選擇。因此，針對不同CHO細胞系，建議優化硫酸葡聚糖的分子量和濃度，以發揮硫酸葡聚糖在單克隆抗體生產中的有益作用。
目前也有很多用硫酸葡聚糖鈉鹽,Mw 5,000 ，平均分子量約5 kD，可通過改變細胞表面的電荷，來促使單個細胞懸浮，防止細胞結團，支持細胞高密度培養，提高細胞活力。
Seebio?提供兩款高品質細胞抗結團用硫酸葡聚糖鈉Mw5000，Mw40000
產品特點
1、 質量優良：純度高，含硫量15~20%；
2、 穩定性高：聚陰離子復合物，可溶于水，形成無色溶液，形似天然粘多糖；
3、 內毒素低：低于5EU/g，對細胞傷害較小。
3、 性能突出: 能有效降低CHO、T細胞培養結團。
產品指標
總硫含量 | 15~20% |
硫酸根含量 | ≤0.2% |
熱失重（105℃，2h） | ≤10.0% |
pH | 5.0~7.5 |
旋光度 | +75°~ +105° |
鐵離子 | ≤2.0% |
氯離子含量 | ≤1000ppm |
外觀 | 白色~淡黃色粉末 |
微生物限度 | 需氧菌＜105 cfu/g |
霉菌、酵母菌總數 | ＜100 cfu/g |
內毒素 | ＜5EU/g |
訂購信息
貨號 | 產品名稱 |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 5,000（DSS） | |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 5,000（DSS），低內毒素 | |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 40,000（DSS），低內毒素 |
Seebio葡聚糖硫酸鈉系列產品
各類不同用途葡聚糖硫酸鈉（DSS）
葡聚糖硫酸鈉 | 腸炎模型 | 分子生物學 | 抗病毒 | 抗凝血劑 | 抗血脂劑 | 化妝品研發 |
6000-8000 | √ | √ | √ | |||
8000（平均） | √ | √ | √ | |||
36000-50000 | √ | √ | √ | |||
400000-600000 | √ | √ | √ | |||
1400000（平均） | √ | √ |
產品信息
貨號 | 產品名稱 |
硫酸葡聚糖鈉 2000（DSS） | |
硫酸葡聚糖鈉 3000（DSS） | |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 5,000（DSS） | |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 5,000（DSS），低內毒素 | |
硫酸葡聚糖鈉 15000（DSS） | |
硫酸葡聚糖鈉 40,000（DSS） | |
Seebio? 硫酸葡聚糖鈉鹽 40,000（DSS），低內毒素 | |
硫酸葡聚糖鈉 36,000~50,000（DSS） | |
硫酸葡聚糖鈉 500,000（DSS） |
西寶生物可以提供各種規格的硫酸葡聚糖鈉，平均分子量從2,000~500,000，歡迎致電400-021-8158.
